臺(tái)式電鏡作為一種微觀觀測(cè)工具,在材料科學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等眾多領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。為了獲得高質(zhì)量的圖像和準(zhǔn)確的分析結(jié)果,掌握正確的操作技巧以及樣品制備方法是至關(guān)重要的。 一、臺(tái)式電鏡的操作技巧
?。ㄒ唬╅_(kāi)機(jī)與關(guān)機(jī)操作
?開(kāi)機(jī)前準(zhǔn)備
檢查儀器連接:確保電鏡的電源線、真空系統(tǒng)連接等均正常,無(wú)松動(dòng)或損壞現(xiàn)象。
環(huán)境檢查:確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境溫度、濕度在規(guī)定范圍內(nèi)。
?開(kāi)機(jī)步驟
打開(kāi)總電源開(kāi)關(guān),啟動(dòng)真空系統(tǒng)。等待真空系統(tǒng)達(dá)到預(yù)設(shè)的真空度,這一過(guò)程可能需要數(shù)分鐘至數(shù)十分鐘不等,具體時(shí)間取決于電鏡型號(hào)和環(huán)境條件。
打開(kāi)控制臺(tái)電源,待儀器自檢完成后,進(jìn)入操作界面。
?關(guān)機(jī)步驟
先關(guān)閉電鏡的成像功能,停止采集圖像。
關(guān)閉控制臺(tái)電源,然后關(guān)閉真空系統(tǒng)電源,關(guān)閉總電源開(kāi)關(guān)。
?。ǘ悠酚^察操作
?樣品定位
使用樣品臺(tái)的移動(dòng)旋鈕,將樣品移動(dòng)到電子束的掃描區(qū)域內(nèi)。對(duì)于較大的樣品,可以先通過(guò)低倍物鏡進(jìn)行粗定位,然后再切換到高倍物鏡進(jìn)行調(diào)整。
在定位過(guò)程中,要注意避免電子束對(duì)樣品造成不必要的損傷,尤其是對(duì)于生物樣品和一些敏感材料。
?放大倍數(shù)調(diào)整
根據(jù)觀察需求,選擇合適的放大倍數(shù)。
在調(diào)整放大倍數(shù)時(shí),要注意保持樣品在視野內(nèi)的位置穩(wěn)定,避免因放大倍數(shù)變化而導(dǎo)致樣品移出視野。
?焦距調(diào)節(jié)
通過(guò)調(diào)節(jié)焦距旋鈕,使圖像達(dá)到清晰的狀態(tài)。在調(diào)節(jié)過(guò)程中,可以采用先粗調(diào)后微調(diào)的方法,避免過(guò)度調(diào)節(jié)導(dǎo)致圖像模糊或失焦。
對(duì)于一些特殊的樣品,可能需要采用自動(dòng)焦距調(diào)節(jié)功能來(lái)提高焦距調(diào)節(jié)的效率和準(zhǔn)確性。
?。ㄈ﹫D像采集與分析
?圖像采集
設(shè)置合適的采集參數(shù),曝光時(shí)間的長(zhǎng)短取決于樣品的特性和所需的圖像質(zhì)量,較長(zhǎng)的曝光時(shí)間可以獲得更亮的圖像,但也可能會(huì)引入更多的噪聲。
啟動(dòng)圖像采集程序,采集所需的圖像。在采集過(guò)程中,要注意觀察圖像的質(zhì)量。
?圖像分析
利用圖像分析軟件對(duì)采集到的圖像進(jìn)行處理和分析。常見(jiàn)的圖像分析功能包括圖像增強(qiáng)、測(cè)量、計(jì)數(shù)等。
圖像增強(qiáng)可以通過(guò)調(diào)整對(duì)比度、亮度、銳化等參數(shù)來(lái)提高圖像的清晰度和可觀察性;測(cè)量功能可以用于測(cè)量樣品的尺寸、形狀等參數(shù);計(jì)數(shù)功能可以用于統(tǒng)計(jì)樣品中特定結(jié)構(gòu)或顆粒的數(shù)量。
二、臺(tái)式電鏡的樣品制備
?。ㄒ唬K狀樣品制備
?表面處理
對(duì)于金屬、陶瓷等塊狀樣品,先要對(duì)其進(jìn)行打磨和拋光處理,以獲得平整光滑的表面。打磨時(shí)可以使用不同粒度的砂紙,從粗到細(xì)逐步進(jìn)行,用拋光劑進(jìn)行拋光,使表面粗糙度達(dá)到納米級(jí)水平。
對(duì)于生物組織和細(xì)胞等軟質(zhì)塊狀樣品,需要進(jìn)行固定、脫水、包埋等處理。
?導(dǎo)電處理(針對(duì)非導(dǎo)電樣品)?
對(duì)于一些非導(dǎo)電的塊狀樣品,在觀察前需要進(jìn)行導(dǎo)電處理,以避免電子束在樣品表面積累電荷,導(dǎo)致圖像失真。常見(jiàn)的導(dǎo)電處理方法有蒸鍍金屬膜、離子濺射鍍膜等。
(二)粉末樣品制備
?分散處理
將粉末樣品分散在合適的溶劑中,通過(guò)超聲、攪拌等方法使其均勻分散。對(duì)于一些容易團(tuán)聚的粉末,可以加入適量的分散劑來(lái)防止團(tuán)聚。
?制樣方法
常用的制樣方法有滴樣法、涂片法和壓片法等。滴樣法是將分散好的粉末溶液滴在載玻片或其他基底上,待溶劑揮發(fā)后形成薄膜;涂片法是將粉末均勻地涂抹在基底上;壓片法是將粉末樣品放入模具中,通過(guò)加壓使其形成具有一定形狀和厚度的樣品片。